益气活血方介导P38MAPK信号通路促进突出椎间盘组织重吸收的机制研究

中文关键词: 益气活血方  破裂型椎间盘突出  重吸收  P38MAPK信号通路  基因表达调控  大鼠  实验研究

中文摘要:

      目的：以P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）为切入点，研究益气活血方促进破裂型椎间盘突出组织重吸收的作用机制。方法：将大鼠随机分为对照组、中药组和中药+P38阻断剂组，通过刺破大鼠自体尾椎椎间盘包埋至L4-5背部肌肉的方法统一制作破裂型椎间盘突出重吸收模型。对照组予腹腔注射2%二甲基亚砜（DMSO），生理盐水灌胃；中药组予腹腔注射2% DMSO，益气活血方灌胃；中药+P38阻断剂组予腹腔注射P38特异性阻断剂，益气活血方灌胃。各组均用药干预4周后处死并取出包埋的椎间盘，称重并计算椎间盘减少质量，HE染色镜下观察椎间盘形态退变情况，Real Time PCR法检测P38MAPK、基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）等指标的mRNA表达，Western Blot法检测VEGF、MMP-3、MMP-9、P38MAPK、磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶（P-P38MAPK）的蛋白表达。结果：治疗4周后，中药组大鼠椎间盘质量减小值明显高于其他2组（P<0.05）。镜下观察，3组移植椎间盘的组织形态均出现较为明显的退变；与对照组和中药+P38阻断剂组相比，中药组移植椎间盘的组织退变和髓核细胞凋亡更明显。中药组治疗后椎间盘髓核组织中P38MAPK、VEGF、MMP-3、MMP-9的mRNA相对表达量明显高于其他2组（P<0.05），髓核组织中P38MAPK、VEGF、MMP-3、MMP-9及P-P38MAPK的蛋白表达水平明显高于其他2组（P<0.05）。结论：益气活血方能激活P38MAPK信号通路的磷酸化，调控突出髓核组织的新生血管化，提高基质金属蛋白酶的表达，促进细胞外基质（ECM）的降解失衡及细胞的凋亡，显著促进突出椎间盘组织的退变和重吸收。

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