“痹痛方”对胶原诱导关节炎模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响

中文关键词: 痹痛方  实验性关节炎  炎症因子  实验研究  小鼠

中文摘要:

      目的：观察痹痛方对胶原诱导关节炎（Collagen Induced Arthritis，CIA）模型小鼠血清和关节组织中炎症因子表达的影响，探讨痹痛方治疗类风湿关节炎的抗炎作用机制。方法：将50只DBA/1小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、模型组和痹痛方小、中、大剂量组。除空白对照组外，其余各组采用牛Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠模型。造模成功后，痹痛方小、中、大剂量组分别予痹痛方0.108、0.432、1.728g/kg灌胃，模型组和空白对照组灌胃等量生理盐水，每日1次，连续灌胃28d。末次灌胃后处死小鼠并取材，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中白介素-6（IL-6）、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子（TNF-α）的表达，实时荧光定量法（RT-PCR）检测小鼠关节组织中炎症因子IL-6、IL-10、IL-23和干扰素γ（IFN-γ）、干扰素γ受体1（IFN-γR1）、IFN-γR2 mRNA的表达，免疫印迹分析法（Western Blot）检测小鼠关节组织中IL-6和IL-10蛋白的表达，苏木精-伊红染色法（HE）观察关节组织形态变化，免疫组织化学法（IHC）检测小鼠关节中IL-6的表达。结果：干预结束后，模型组小鼠血清中IL-6、IL-17、TNF-α表达，关节组织中IL-6、IFN-γR1 mRNA和IL-6蛋白表达均较空白对照组明显升高（P<0.001，P<0.01）。HE染色和IHC显示模型组小鼠关节腔界限不清晰，腔内狭窄，大量炎性细胞浸润，可见大量的IL-6阳性细胞表达。痹痛方各剂量组小鼠血清中IL-6水平，关节组织中IL-6、IL-10、IFN-γR1 mRNA和IL-6蛋白表达均明显低于模型组（P<0.05，P<0.01，P<0.001）；痹痛方小剂量和大剂量组小鼠关节组织中IL-23 mRNA表达明显低于模型组（P<0.05）；痹痛方小剂量和中剂量组小鼠关节组织中IL-10蛋白表达明显低于模型组（P<0.05，P<0.01）。病理结果示，痹痛方各剂量组小鼠关节炎症减轻，IL-6表达减少。痹痛方各剂量组之间比较，血清中IL-17、TNF-α，关节组织中IL-6、IL-10、IL-23、IFN-γR1 mRNA和IL-6、IL-10蛋白的表达均有统计学差异（P<0.05，P<0.01，P<0.001）。结论：痹痛方可减轻胶原诱导关节炎模型小鼠关节炎症，其可能的作用机制为抑制IL-6为主的炎症因子的表达，同时升高抑炎因子IL-10的表达。

英文摘要: