补阳还五汤含药血清对TGF-β1诱导的人肺动脉内皮细胞Dll4/Notch4信号的调控作用

中文关键词: 补阳还五汤  特发性肺纤维化  内皮细胞  肺动脉  细胞株  内皮间质转化  新西兰兔  实验研究

中文摘要:

      目的：观察补阳还五汤含药血清对转化生长因子（TGF）-β₁诱导的人肺动脉内皮细胞（HPAEC） Dll4/Notch4信号的调控作用。方法：以53.36 g/（kg·d）剂量灌胃家兔，制备补阳还五汤含药血清，等容积生理盐水灌胃制备空白血清。体外培养HPAEC细胞，TGF-β₁诱导建立内皮间质转化（EndMT）模型，设立空白组（10%空白血清）、模型组（10%空白血清+TGF-β₁）、DAPT组（10%空白血清+DAPT+TGF-β₁）、10%含药血清组（10%含药血清+TGF-β₁）、5%含药血清组（5%含药血清+5%空白血清+TGF-β₁）和2.5%含药血清组（2.5%含药血清+7.5%空白血清+TGF-β₁）6组。采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA的表达，采用蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测各组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1蛋白的表达，采用免疫共沉淀（Co-IP）法检测各组HPAEC细胞NICD4与CBF1的相互作用。结果：与空白组比较，模型组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA及蛋白表达均显著升高（P<0.01），且NICD4与CBF1有结合作用；与模型组比较，DAPT组和补阳还五汤各剂量含药血清组HPAEC细胞Notch4、Dll4和CBF1 mRNA及蛋白表达均降低，NICD4与CBF1的结合被抑制，随着含药血清浓度的增加，作用越明显。结论：补阳还五汤含药血清可抑制TGF-β₁诱导的HPAEC细胞的Dll4/Notch4信号，这可能是其干预内皮间质转化的机制之一。

英文摘要: