“柴胡三参胶囊”预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其与MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路的关系

中文关键词: 急性心肌梗死  柴胡三参胶囊  心肌缺血再灌注损伤  炎症  混合谱系酶3  p38丝裂原激活蛋白激酶  NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

中文摘要:

      目的：探讨柴胡三参胶囊通过MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路减轻炎症反应对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠心脏的保护作用。方法：将72只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、地尔硫卓组（每日给药量： 51mg/kg）及柴胡三参胶囊低、中、高剂量组（每日给药量： 216、432、864mg/kg），每组12只。各给药组灌胃给予相应药液，假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水，均每日1次，连续7d。预处理结束后，除假手术组外，其余各组大鼠采用结扎冠状动脉左前降支并再灌注的方法建立MIRI模型，再灌注结束后立即取血、取全心，假手术组只穿线，不结扎。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测每组6只大鼠血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量，苏木素-伊红（HE）染色法观察每组3只大鼠心肌组织病理变化，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法观察每组5只大鼠心肌梗死范围，蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测每组3只大鼠心肌组织中混合谱系酶3（MLK3）、p38丝裂原激活蛋白激酶（p38 MAPK）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、白细胞介素-1β （IL-1β）蛋白表达水平。结果：模型组大鼠血清CK-MB、cTnI含量显著高于假手术组（P＜ 0.01），心肌细胞排列紊乱、肥大水肿，心肌梗死面积占比明显大于假手术组（P＜ 0.01），缺血区心肌组织炎症相关蛋白MLK3、p38 MAPK、NLRP3、IL-1β的表达均显著高于假手术组（P＜ 0.01，P＜ 0.05）。各给药组大鼠血清CK-MB、cTnI水平均显著低于模型组（P＜ 0.01） ；柴胡三参胶囊中、高剂量组与地尔硫卓组大鼠血清CK-MB、cTnI水平显著低于柴胡三参胶囊低剂量组（P＜ 0.01），而此3组大鼠上述指标组间比较差异无统计学意义（P＞ 0.05）。柴胡三参胶囊中、高剂量组及地尔硫卓组大鼠心肌细胞排列较整齐，心肌细胞水肿范围少于模型组，其中以柴胡三参胶囊高剂量组及地尔硫卓组改善最明显。柴胡三参胶囊中、高剂量组与地尔硫卓组大鼠心肌梗死面积占比明显低于模型组（P＜ 0.01），3组大鼠心肌梗死面积占比组间比较差异无统计学意义（P＞ 0.05），柴胡三参胶囊中剂量组、地尔硫卓组大鼠心肌梗死面积占比明显低于低剂量组（P＜ 0.01）。柴胡三参胶囊中、高剂量组及地尔硫卓组大鼠心肌组织MLK3、p38 MAPK、NLRP3、IL-1β蛋白表达水平明显低于模型组和柴胡三参胶囊低剂量组（P＜ 0.01），其中地尔硫卓组MLK3蛋白表达明显低于柴胡三参胶囊高剂量组（P＜ 0.05），NLRP3蛋白表达明显低于柴胡三参胶囊中、高剂量组（P＜ 0.01）。结论：柴胡三参胶囊中、高剂量预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤，其可能通过MLK3-p38 MAPK-NLRP3信号通路减轻炎症反应实现对MIRI模型大鼠的心肌保护作用。

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