新工艺炮制的熟地黄对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的作用及机制研究

Effect and Mechanism of Rehmannia Glutinosa Processed by New Technic on Learning and Memory Impairment in D-galactose-induced Aged Mice

中文关键词: 熟地黄  炮制  改良  D-半乳糖  衰老  学习记忆  氧化应激  肠道菌群

中文摘要:

      目的：研究使用生地黄与黄精联合炮制新工艺炮制的熟地黄对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍的干预作用及作用机制。方法：选取若干SPF级昆明小鼠，采用皮下注射D-半乳糖的方法制备衰老小鼠学习记忆障碍模型，另取12只小鼠作为空白对照组，同期皮下注射等量生理盐水，连续8周。造模4周后，将造模成功（逃避潜伏期大于60s）的小鼠随机分为模型组、银杏叶片组（每日给药量0.01g/kg）、传统工艺熟地黄组（每日给药量1.95g/kg）和新工艺熟地黄组（每日给药量1.95g/kg），每组12只。各给药组小鼠灌胃给予相应药物，空白对照组、模型组小鼠灌胃给予等体积生理盐水，各组均每日灌胃1次，连续4周。每周称取各组小鼠体质量；灌胃结束后使用Morris水迷宫定位导航、空间搜索法检测各组小鼠学习记忆能力，酶联免疫吸附法（ELISA法）检测各组小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）含量，苏木素-伊红（HE）染色法观察各组小鼠脑组织病理形态，16S rRNA Miseq高通量测序法检测各组小鼠肠道菌群分布。结果：造模第2周开始，模型组小鼠体质量明显低于空白对照组（P＜0.05，P＜0.01）；造模第6周（即给药第2周）开始各给药组小鼠体质量均明显高于模型组（P＜0.05，P＜0.01）。模型组小鼠逃避潜伏期明显高于空白对照组（P＜0.01），穿越平台次数明显少于空白对照组（P＜0.01）；各给药组小鼠上述指标均较模型组有显著改善（P＜0.01）。模型组小鼠血清MDA水平明显高于空白对照组（P＜0.01），SOD、GSH-Px水平明显低于模型组（P＜0.01）；各给药组小鼠上述指标均较模型组有显著改善（P＜0.01）。模型组小鼠海马CA1区组织神经细胞固缩、破裂、水肿明显，各给药组小鼠海马CA1区组织病理改变均较模型组改善。模型组小鼠肠道菌群Shannon和Simpson指数水平均明显低于空白对照组（P＜0.01），各给药组小鼠上述指数水平均明显高于模型组（P＜0.01）。模型组小鼠肠道微生物中厚壁菌门、拟杆菌门、乳杆菌科、普雷沃菌属相对丰度均明显低于空白对照组（P＜0.05），各给药组上述微生物相对丰度均明显高于模型组（P＜0.05）；模型组小鼠肠道微生物中肠杆菌科、梭菌属、肠球菌属相对丰度均明显高于空白对照组（P＜0.05），各给药组上述微生物相对丰度均明显低于模型组（P＜0.05）。银杏叶片、传统工艺熟地黄和新工艺熟地黄对本研究各观察指标的改善程度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：新工艺炮制的熟地黄对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆障碍具有明显的改善作用，其作用与传统工艺炮制的熟地黄、阳性药物银杏叶片相当，其可能通过调整衰老学习记忆障碍模型小鼠肠道微生物的丰度和多样性、抗氧化应激而保护衰老脑组织。

英文摘要: